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                使用Minilys均质器从植物叶子中提取DNA
                来源: Admin    更新时间: 2013-03-25    浏览: 1429 人次

                 

                 

                 

                 

                简介

                 

                 

                 

                 

                 

                MinilysPrecellys 24均是研磨裂解均质为一体的多功能均质器专门用来提取各种各样生物样本的DNARNA蛋?#23383;?/B>。其工作原理通过三维高速振动辅助研磨珠(玻璃珠、陶瓷珠、?#31181;?#31561;)的敲打,达到对样品进行研磨裂解均质的目的。Minilys小巧、简洁,属于个人型均质器,而Precellys 24能应付较高的通量。两?#20013;?#21495;都能够在0.5mL, 2mL 7mL 管子中对样本进行均质研磨裂解。通过这种机械化裂解得到的样品能够进一步使用多种分析方法进行分析,比如DNA-RNA电泳实时定量PCRWestern-blot分析气相色谱法-质谱法联用分析液相色谱法-质谱法联用分析等?#21462;?#26412;文此次介绍MinilysPrecellys 24研磨植物叶子提取DNA并进行定量分析,对比两?#20013;?#21495;的均质效果。

                 

                 

                 

                 

                 

                 

                材料

                 

                 

                 

                 

                 

                ·

                Minilys均质器

                ·

                瓷珠(Precellys kit: 03961-1-010 (1.4 & 2.8 ceramic beads mix)

                ·

                DNA提取液(peqGOLD Plant DNA mini Kit

                ·

                样本: 100 mg植物叶子

                ·

                缓冲液: 100 μl TE buffer

                 

                 

                 

                 

                 

                 

                Minilys

                Precellys 24

                方法

                 

                 

                 

                 

                 

                Minilys: 5000 rpm, 30 sec

                数据分析: 使用DNA提取液直接从裂解样本中提取总基因组DNA,?#32531;?#20351;用分光光度计检测DNA的含量。

                 

                 

                 

                 

                结果

                 

                 

                 

                 

                 

                使用Minilys提取植物叶子的总基因组DNA,使用分光光度计(BMG Labtech)测定DNA的浓度和吸光度比值,如Figure 1所示。使用Minilys得到的总基因组DNA与使用Precellys得到的量相当。

                 

                 

                 

                 

                 

                 

                 

                Figure 1: mean concentration of total genomic DNA from 3 extracted samples of leaves with Minilys (run 1 and 2) in comparison with Precellys 24. The corresponding mean absorption ratios (260/280; 260/230) are also plotted.

                 

                Figure 2: illustration of absorption analysis using a BMG microplate reader.

                 

                 

                 

                 

                无论是Minilys还是Precellys 24均质器都能得到高质量且相当质量的总基因组DNA. 在低通量的实验需求中Minilys具备高效、省时、易用等多个方面的优势。相比传统的研钵研磨破碎方法,Minilys能使均质化过程中可能会遇到的交叉污染问题得到克服。

                 

                 
                 
                 
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